本發明專利技術公開了一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法及應用，通過將待測藥品兩次成鹽修飾轉換，得到含有高濃度的供試品溶液，利用高效液相色譜法檢測供試品溶液中目標雜質的含量。可以將藥品和基因毒性雜質有效分離，顯著提高供試品溶液和基因毒性雜質對照品溶液的濃度，滿足高效液相色譜法的檢測限度要求，在一些低限度雜質檢測方面可彌補實驗室未配備質譜儀的缺陷，避免委托第三方檢測，有助于降低企業的研發投入。基于該方法提出的一種JD56192原料藥或藥物制劑中基因毒性雜質對甲苯磺酸乙酯的定量分析方法，可有效分離JD56192與對甲苯磺酸乙酯，經方法學驗證結果符合要求，精準性高，專屬性強，操作簡單、快速。快速。快速。
【技術實現步驟摘要】
一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法及應用
[0001]本專利技術涉及藥品檢測
，具體涉及一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法及應用。
技術介紹
[0002]隨著藥品監管機構對藥品中雜質研究和控制要求的提高，雜質研究及控制已步入雜質譜控制研究階段，并且對已知雜質分別制訂了限度。《ICH M7：誘變性雜質評估和控制》為評估遺傳毒性雜質提供了指導，規定了臨床開發過程中已知遺傳毒性和潛在遺傳毒性雜質的可接受限度。為了保證藥物的質量安全，2002年歐洲藥物管理局(EMA)最先出臺了關于基因毒性雜質的管理法規，美國食品藥品管理局(FDA)、國際人用藥品注冊技術要求國際協調會(ICH)等組織也針對基因毒性雜質先后頒發了相關界定、分類、限度、檢測和風險評估程序等一系列指南，目前基因毒性雜質含量已經成為藥品獲批及上市的關鍵指標之一。
[0003]采用高效液相色譜法測定藥品中限度較低的基因毒性雜質，儀器靈敏度難以達到檢測要求。目前，在實際應用中，對于低限度的雜質，通常采用高靈敏度的質譜儀進行檢測。但由于質譜儀高昂的價格限制了其使用門檻，未能夠在國內各實驗室全面普及，故許多企業對這些低限度雜質的控制采用委托第三方檢測的方式，無形中增加了等待檢測結果的時間，影響企業的整體研發進度，同時委托第三檢測的費用也不低，增加了企業的研發投入成本。
[0004]JD56192是由常州佳德醫藥科技有限公司研發的一類抗腫瘤新藥，其結構式如下式1所示，其合成過程中使用了原料對甲苯磺酸和乙醇，生成的副產物對甲苯磺酸乙酯屬于潛在基因毒性雜質，需要控制對甲苯磺酸乙酯在JD56192原料藥中的限度不得超過0.001％。藥品JD56192在常用有機溶劑中的溶解度很低，采用直接溶解方式處理樣品，其靈敏度遠達不到高效液相色譜法對甲苯磺酸乙酯的檢測限度要求。為了嚴格控制對甲苯磺酸乙酯的含量，尋求一種簡單、快捷、專屬性強、靈敏度高的分析方法顯得猶為重要。
[0005][0006]基于上述技術問題，本專利技術提出一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法及應用，以期解決上述技術問題。
技術實現思路
[0007]本專利技術的目的在于，克服現有技術中存在的缺陷，提供一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法及應用，通過兩次藥品的成鹽修飾轉換，可以將藥品和基因
毒性雜質有效分離，顯著提高供試品溶液和基因毒性雜質對照品溶液的濃度，以滿足高效液相色譜法的檢測限度要求，拓展了高效液相色譜法的應用領域，在一些低限度雜質檢測方面可彌補實驗室未配備質譜儀的缺陷，避免委托第三方檢測，有助于降低企業的研發投入。本專利技術的一種用于JD56192原料藥或藥物制劑中基因毒性雜質對甲苯磺酸乙酯的定量分析方法，為上述一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法的應用，可有效分離JD56192與基因毒性雜質對甲苯磺酸乙酯，空白稀釋液不干擾基因毒性雜質檢測，經方法學驗證結果符合要求，精準性高，專屬性強，操作步驟簡單、快速。
[0008]為實現上述目的，本專利技術的技術方案之一，設計一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法，包括如下步驟：
[0009]S1：將待測藥品溶解于目標雜質的良溶劑中，形成懸濁液A，然后向懸濁液A中加入適量的調節劑B，使待測藥品成鹽修飾轉換為溶解度好的鹽，并形成溶液C；
[0010]S2：向步驟S1制備的溶液C中加入適量的調節劑D，使待測藥品成鹽修飾轉換為溶解度差的鹽，并形成懸濁液E，靜置充分沉淀后，將懸濁液E過濾，得到供試品溶液F；
[0011]S3：利用高效液相色譜法檢測步驟S2所制備供試品溶液F中目標雜質的含量。
[0012]優選的技術方案有，所述的調節劑B為酸或堿中的一個，所述的調節劑D為酸或堿中的另一個。
[0013]進一步優選的技術方案有，所述的酸為有機酸或無機酸，所述的堿為有機堿或無機堿。
[0014]進一步優選的技術方案還有，所述的有機酸為甲酸、乙酸、甲磺酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、枸櫞酸中的一種，所述的無機酸為鹽酸、硫酸、氫溴酸、磷酸中的一種，所述的有機堿為葡甲胺、氨基丁三醇、甲胺、二乙胺、三乙胺中的一種，所述的無機堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂、氫氧化鐵、碳酸鈉、碳酸氫鈉中的一種。
[0015]本專利技術的技術方案之二，提出一種用于JD56192原料藥或藥物制劑中基因毒性雜質對甲苯磺酸乙酯的定量分析方法，所述的方法為上述的一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法的應用，包括如下步驟：
[0016]W1：標準儲備液的制備，精密稱取對甲苯磺酸乙酯對照品，用乙腈溶解并稀釋制成每1mL中含上述對照品1mg的標準儲備液，后逐步稀釋成所需的濃度；
[0017]W2：樣品進行前處理，稱取JD56192供試品，溶解于目標雜質的良溶劑中，形成懸濁液A，用酸調節pH至酸性，超聲，形成溶液C，用堿調節pH至堿性，形成懸濁液E，用上述良溶劑定容，搖勻，靜置充分沉淀，液固相分離后過濾，得到供試品溶液F，所述的良溶劑為乙腈水溶液；
[0018]W3：采用高效液相色譜法對JD56192原料藥或包含JD56192的藥物制劑進行質量分析：所用高效液相色譜儀的檢測器為紫外檢測器，色譜條件如下：流動相為乙腈
?
磷酸水溶液；采用線性梯度洗脫的方式，所述線性梯度洗脫參數：流速：0.8～1.2mL/min；柱溫：30～40℃；檢測波長：225nm；進樣量：20μL；十八烷基鍵合硅膠色譜柱；洗脫時間和流動相參數如下表1所示，其中流動相A為乙腈、流動相B為磷酸水溶液。
[0019]表1線性梯度洗脫時間和流動相體積進料比
[0020][0021]優選的技術方案有，所述的步驟W1中，逐步稀釋成所需的濃度中的稀釋劑為體積比為34∶66的乙腈
?
水。
[0022]進一步優選的技術方案有，所述的步驟W2中，所述的良溶劑為體積比為46∶54的乙腈
?
水，用0.5mol/L的鹽酸水溶液調節pH為3～5，用0.5mol/L的氫氧化鈉水溶液調節pH為9.5～10；于0℃靜置充分沉淀30min。
[0023]進一步優選的技術方案還有，所述的步驟W3中，流動相B為質量濃度0.1％的磷酸水溶液。
[0024]進一步優選的技術方案還有，所述的步驟W3中，色譜柱為4.6mm
×
250mm、5μm的C18色譜柱；流速為1.0mL/min；柱溫：35℃。
[0025]本專利技術的優點和有益效果在于：
[0026]1、本專利技術的一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法，通過兩次藥品的成鹽修飾轉換，可以將藥品和基因毒性雜質有效分離，顯著提高供試品溶液和基因毒性雜質對照品溶液的濃度，以滿足高效液相色譜法的檢測限度要求，拓展了高效液相色譜法的應用領域，在一些低限度雜質檢測方面可彌補實驗室未配備質譜儀的缺陷，避免委托第三方檢測，有助于降低企業的研發投入。
[0027]2本文檔來自技高網...
【技術保護點】
【技術特征摘要】
1.一種利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法，其特征在于，包括如下步驟：S1：將待測藥品溶解于目標雜質的良溶劑中，形成懸濁液A，然后向懸濁液A中加入適量的調節劑B，使待測藥品成鹽修飾轉換為溶解度好的鹽，并形成溶液C；S2：向步驟S1制備的溶液C中加入適量的調節劑D，使待測藥品成鹽修飾轉換為溶解度差的鹽，并形成懸濁液E，靜置充分沉淀后，將懸濁液E過濾，得到供試品溶液F；S3：利用高效液相色譜法檢測步驟S2所制備供試品溶液F中目標雜質的含量。2.如權利要求1所述的利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法，其特征在于，所述的調節劑B為酸或堿中的一個，所述的調節劑D為酸或堿中的另一個。3.如權利要求2所述的利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法，其特征在于，所述的酸為有機酸或無機酸，所述的堿為有機堿或無機堿。4.如權利要求3所述的利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法，其特征在于，所述的有機酸為甲酸、乙酸、甲磺酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、枸櫞酸中的一種，所述的無機酸為鹽酸、硫酸、氫溴酸、磷酸中的一種，所述的有機堿為葡甲胺、氨基丁三醇、甲胺、二乙胺、三乙胺中的一種，所述的無機堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂、氫氧化鐵、碳酸鈉、碳酸氫鈉中的一種。5.一種用于JD56192原料藥或藥物制劑中基因毒性雜質對甲苯磺酸乙酯的定量分析方法，其特征在于，所述的方法為上述權利要求1～4任一項所述的利用高效液相色譜法檢測藥品中低限度雜質的方法的應用，包括如下步驟：W1：標準儲備液的制備，精密稱取對甲苯磺酸乙酯對照品，用乙腈溶解并稀釋制成每1mL中含上述對照品1mg的標準儲備液，后逐步稀釋成所需的濃度；W2：樣品進行前處理，稱取JD56192供試品，溶解于目標雜質的良溶劑中，形成懸濁液A，用酸調節pH至酸性，超聲，形成溶液C，用堿調節pH至堿性，形成懸濁液...
【專利技術屬性】
技術研發人員：朱小華，張林，焦靈，
申請(專利權)人：常州佳德醫藥科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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