核苷氨基磷酸酯類前藥的制備方法及其中間體技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種新的核苷氨基磷酸酯類前藥的制備方法及其中間體。具體采用將第一步反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行異構(gòu)體分離，再經(jīng)過2步化學(xué)合成，制備高純度化合物（Sp-1）。該方法操作簡(jiǎn)便，成本低，最終制備的單一異構(gòu)體（Sp-1）純度高，HPLC純度在97%以上，進(jìn)一步的在99%以上，該方法適合工業(yè)化生產(chǎn)，能夠滿足臨床研究需要。另外，本發(fā)明專利技術(shù)還提供了制備高純度化合物Sp-1的關(guān)鍵中間體磷試劑及其制備方法。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及醫(yī)藥
，具體涉及核苷氨基磷酸酯類前藥的制備方法及其中間體。
技術(shù)介紹
NUC-1031是吉西他濱前藥，由NuCanaBioMed公司開發(fā)，目前處于臨床II期，用于治療晚期實(shí)體瘤，胰腺癌，乳腺癌等癌癥。NUC-1031的CAS為840506-29-8，具有如下式1所示的結(jié)構(gòu)，下式Rp-1和Sp-1分別是NUC-1031的P的對(duì)映異構(gòu)體：，，。WO2005012327說明書第70頁(yè)公開了NUC-1031的具體結(jié)構(gòu)及制備方法，具體采用吉西他濱與芐基-（苯甲酰基-L-丙氨酸）-氯代磷酸酯以摩爾比為1:3，在NMI存在條件下，以THF/吡啶為溶劑反應(yīng)2小時(shí)，得到粗品，采用硅膠柱分離純化，以二氯甲烷/甲醇（95:5）洗脫，得到泡沫狀固體為NUC-1031，收率僅為16%。WO2014076490A1公開了以下制備NUC-1031的方法，，將3’-Boc保護(hù)的吉西他濱（100mg）與2mol當(dāng)量的苯基（芐基-L丙氨酸）氯代磷酸酯（150mg）反應(yīng)，并以0.5mol當(dāng)量的三（乙酰丙酮）鐵（III）（56mg）作為催化劑，1.5mol當(dāng)量的DIPEA(55μL)作為堿，10mlTHF作為反應(yīng)溶劑，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，室溫反應(yīng)24小時(shí)，收率45%，其中異構(gòu)體Rp:Sp=3:1。題目為ApplicationofProTideTechnologytoGemcitabine:ASuccessfulApproachtoOvercometheKeyCancerResistanceMechanismsLeadstoaNewAgent(NUC-1031)inClinicalDevelopment（JournalofMedicinalChemistry，Volume57，Issue4，Pages1531-1542）的文獻(xiàn)報(bào)道了下式化合物5f以二氯甲烷為溶劑，在TFA存在下脫去羥基保護(hù)，最后通過硅膠柱純化制備NUC-1031的方法，收率70%，其中異構(gòu)體的含量分別為48%，52%；。目前現(xiàn)有技術(shù)中沒有關(guān)于NUC-1031單一異構(gòu)體的制備方法報(bào)道，由于NUC-1031分子結(jié)構(gòu)中手性P的兩個(gè)對(duì)應(yīng)異構(gòu)體結(jié)構(gòu)非常相似，極性非常接近，通過從NUC-1031混旋體中分離出高純度的單一異構(gòu)體，變得非常困難，尤其要在純化過程中同時(shí)兼顧純度和收率，就更加困難了。專利技術(shù)人嘗試了本領(lǐng)域常規(guī)的結(jié)晶、硅膠柱層析、C18硅膠鍵合的反相制備色譜和球型硅膠的正相制備色譜以及手性柱拆分等各種方法對(duì)NUC-1031異構(gòu)體進(jìn)行分離，均無法分離出純度不低于90%的單一異構(gòu)體。本領(lǐng)域已知的，通常手性化合物作為藥物使用時(shí)，構(gòu)體構(gòu)型與藥理關(guān)系可分為以下幾種情況：（1）、藥物的藥理作用完全或主要由其中一個(gè)對(duì)映異構(gòu)體產(chǎn)生，如(S)-萘普生的鎮(zhèn)痛作用比T異構(gòu)體強(qiáng)35倍；（2）、兩個(gè)異構(gòu)體具有完全相反的藥理作用，如哌西那朵的右旋異構(gòu)體為阿片受體的激動(dòng)劑，而其左旋體為阿片受體的拮抗劑；（3）、一個(gè)異構(gòu)體具有嚴(yán)重的不良反應(yīng)，如驅(qū)蟲藥四咪唑的嘔吐反應(yīng)即由其右旋體產(chǎn)生；（4）、一種藥理作用具有高度的立體選擇性，而其他的藥理作用的立體選擇性很低或無，如鎮(zhèn)咳藥美沙芬的成癮性主要由其左旋體產(chǎn)生，而鎮(zhèn)咳作用則兩則強(qiáng)度一樣；（5）兩個(gè)對(duì)映體的藥理作用不同，但合并用藥有利，如降壓藥萘必洛爾的右旋體為β-受體阻滯劑，而左旋體能降低外周血管的阻力，并對(duì)心臟有保護(hù)作用。從NUC-1031中分離單一異構(gòu)體（Rp-1）或（Sp-1），并對(duì)其分別進(jìn)行生物活性研究，對(duì)NUC-1031的藥理作用、毒副作用或不良反應(yīng)等研究，以開發(fā)出活性更好，毒副作用更小的類似藥物將具備非常重要的意義。制備能滿足臨床研究需要的高純度單一異構(gòu)體（Rp-1）或（Sp-1），目前仍是本領(lǐng)域亟待解決的問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
為解決上述問題，本專利技術(shù)提供了一種制備高純化合物Sp-1和化合物Rp-1的方法。首先，本專利技術(shù)提供了一種化合物Sp-1的制備方法，該方法包括，使化合物61501c與化合物61501b反應(yīng)，得到化合物61501a：；其中，R為H或羥基保護(hù)基；L為離去基團(tuán)；任選地，當(dāng)R不為H時(shí)，將化合物61501a脫去羥基保護(hù)基，得到化合物Sp-1。優(yōu)選的，L為鹵素、芳氧基、苯磺酸酯基、樟腦磺酸酯基、或被至少一個(gè)吸電子基團(tuán)取代的芳氧基。進(jìn)一步的，優(yōu)選，所述吸電子基團(tuán)為硝基或鹵素。更優(yōu)選的，L為硝基苯氧基、對(duì)氯苯氧基、鄰氯苯氧基、2,4-二硝基苯氧基或五氟苯氧基。上述方法中，優(yōu)選地，羥基保護(hù)基R為硅烷基、烷基或取代的烷基，酰基或取代的酰基，烷氧羰基或取代的烷氧羰基。進(jìn)一步地，所述羥基保護(hù)基R為四氫吡喃基、芐基，對(duì)甲基芐基，乙酰基，丙酰基，丁酰基，苯甲酰基、叔丁氧羰基（Boc）、芐氧羰基（Cbz）、9-笏甲氧羰基（Fmoc）、二甲基叔丁基硅基，三甲基硅基或二甲基苯基硅基。上述方法中，優(yōu)選地，R為H或叔丁氧羰基（Boc），L為五氟苯氧基。其中，當(dāng)R為H時(shí)，化合物Sp-1的制備方法，包括：使化合物61501c（R=H）與化合物61501b反應(yīng)，得到化合物Sp-1；其中，L為芳氧基、苯磺酸酯基、樟腦磺酸酯基、或被至少一個(gè)吸電子基團(tuán)取代的芳氧基。進(jìn)一步的，任選的，還包括將化合物Sp-1經(jīng)過色譜分析、萃取、或結(jié)晶等方法，獲得純化的Sp-1。其中，當(dāng)R為羥基保護(hù)基時(shí)，化合物Sp-1的制備方法，包括：（1）、使化合物61501c（R為羥基保護(hù)基）與化合物61501b反應(yīng)，得到化合物61501a；（2）、將化合物61501a脫去羥基保護(hù)基，得到化合物Sp-1；進(jìn)一步的，任選的，還包括將化合物Sp-1經(jīng)過色譜分析、萃取、或結(jié)晶等方法，獲得純化的Sp-1。其中，L為芳氧基、苯磺酸酯基、樟腦磺酸酯基、或被至少一個(gè)吸電子基團(tuán)取代的芳氧基。其中，所述“羥基保護(hù)基”是指能與羥基結(jié)合生成酯，硅醚，烷基醚的基團(tuán)，包括，硅烷基、烷基或取代的烷基，酰基或取代的酰基。例如，能與羥基結(jié)合生成酯類的羥基保護(hù)基，包括但不限于，C1~6的烷基羰基，如甲酰基、乙酰基、氯乙酰基、丁酰基、丙酰基等；取代的羰基，如叔丁氧羰基（Boc）、芐氧羰基（Cbz）、9-笏甲氧羰基（Fmoc）等；所述形成硅醚類的羥基保護(hù)基，包括但不限于，三氟甲基硅基，三甲基硅基，二甲基苯基硅基，二甲基叔丁基硅基等；所述能與羥基形成烷基醚的羥基保護(hù)基，包括但不限于，C1~6的烷基如甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基等；取代的C1~6的烷基，如芐基、對(duì)甲基芐基、三苯基甲基、四氫吡喃基。上述方法中，根據(jù)本領(lǐng)域常規(guī)的脫去羥基保護(hù)基的方法，脫去化合物61501a的保護(hù)基R，得到化合物Sp-1。例如，當(dāng)R為芐基或取代芐基時(shí)可選擇Pb-C/H2催化氫化的方法脫去保護(hù)基，反應(yīng)溶劑優(yōu)選為THF、甲醇、甲苯或己烷等；當(dāng)R為烷基硅基（如三甲基硅基）時(shí)，優(yōu)選在酸性條件下有機(jī)溶劑中（如HCl-MeOH，HCl-二氧六環(huán)體系，或AcOH-THF體系）脫去烷基硅基保護(hù)基或者通過四烷基氟化銨脫除；當(dāng)R為烷基酰基（如乙酰基，丙酰基、丁酰基等）時(shí)，可選擇在酸性或堿性條件下進(jìn)行水解脫去，如在甲醇鈉條件下，以甲醇為溶劑室溫?cái)嚢杳撊ハ鄳?yīng)的烷基酰基。上述方法中，更進(jìn)一步的，優(yōu)選羥基保護(hù)基R為叔丁氧羰基（Boc）；優(yōu)選在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將化合物61501a在合適的溶劑（例如本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
化合物Sp?1的制備方法，，該方法包括，使化合物61501c與化合物61501b反應(yīng)，得到化合物61501a：；其中，R為H或羥基保護(hù)基；L為離去基團(tuán)；任選地，當(dāng)R不為H時(shí)，將化合物61501a脫去羥基保護(hù)基，得到化合物Sp?1。

【技術(shù)特征摘要】
1.化合物Sp-1的制備方法，，該方法包括，使化合物61501c與化合物61501b反應(yīng)，得到化合物61501a：；其中，R為H或羥基保護(hù)基；L為離去基團(tuán)；任選地，當(dāng)R不為H時(shí)，將化合物61501a脫去羥基保護(hù)基，得到化合物Sp-1。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，L為鹵素、芳氧基、苯磺酸酯基、樟腦磺酸酯基、或被至少一個(gè)吸電子基團(tuán)取代的芳氧基。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述吸電子基團(tuán)為硝基或鹵素。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，L為硝基苯氧基、對(duì)氯苯氧基、鄰氯苯氧基、2,4-二硝基苯氧基或五氟苯氧基。5.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述方法，其特征在于，所述羥基保護(hù)基R為硅烷基、烷基或取代的烷基，酰基或取代的酰基，烷氧羰基或取代的烷氧羰基。6.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述方法，其特征在于，所述羥基保護(hù)基R為四氫吡喃基、芐基，對(duì)甲基芐基，乙酰基，丙酰基，丁酰基，苯甲酰基、叔丁氧羰基（Boc）、芐氧羰基（Cbz）、9-笏甲氧羰基（Fmoc）、二甲基叔丁基硅基，三甲基硅基或二甲基苯基硅基。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，R為H或叔丁氧羰基（Boc），L為五氟苯氧基。8.一種組合物，其特征在于，包含至少約95重量％的量的權(quán)利要求1~7任一項(xiàng)所述方法制備的化合物Sp-1。9.一種組合物其特征在于，包含至少約99重量％的量的權(quán)利要求1~7任一項(xiàng)所述方法制備的化合...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：袁建棟，黃仰青，繆林峰，顧家寧，梁朝華，王征野，孫占莉，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：博瑞生物醫(yī)藥蘇州股份有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：江蘇;32