肽及其用途制造技術(shù)

本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)提供一種用于治療和/或預(yù)防與T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎性疾病相關(guān)的病癥的方法，所述方法通過(guò)向患者施用抑制T細(xì)胞遷移的包含N’-SVTEQGAELSNEER-C’(SEQ?ID?NO:1)的肽或其類(lèi)似物。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)還提供用于治療和/或預(yù)防所述病癥的方法的肽或其類(lèi)似物。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國(guó)外來(lái)華專(zhuān)利技術(shù)】肽及其用途本專(zhuān)利技術(shù)涉及對(duì)T細(xì)胞(包括自身反應(yīng)性T細(xì)胞)的遷移具有抑制作用的分泌自B細(xì)胞的肽的用途。這可應(yīng)用于治療和/或預(yù)防與這樣的T細(xì)胞相關(guān)的病癥，最顯著地是1型糖尿病。引言胰島反應(yīng)性T細(xì)胞在β細(xì)胞破壞中起核心作用并因此在1型糖尿病(T1D)的發(fā)病機(jī)制中起核心作用。明顯地，在T1D胰腺中T細(xì)胞包含大部分的胰島滲入物，并且靶向T細(xì)胞的免疫抑制性藥物保持β細(xì)胞功能。理解胰島反應(yīng)性T細(xì)胞從血液募集，越過(guò)發(fā)炎的內(nèi)皮，并進(jìn)入胰島中的機(jī)制在T1D中沒(méi)有被很好地檢查。這是特別相關(guān)的，因?yàn)榻】档娜艘部梢跃哂胁槐憩F(xiàn)為有害的循環(huán)胰島反應(yīng)性T細(xì)胞。因此，我們認(rèn)為在T1D中，禁止反應(yīng)性T細(xì)胞運(yùn)輸?shù)揭认僦械膬?nèi)源性機(jī)制失效，并且如果這樣的調(diào)控途徑可以再建立，則會(huì)有可能排除自身反應(yīng)性T細(xì)胞并保持β細(xì)胞功能。來(lái)源于脂肪細(xì)胞的細(xì)胞因子脂連蛋白在調(diào)控T細(xì)胞遷移中起作用，但是情景比當(dāng)在T1D中脂連蛋白的循環(huán)水平似乎不波動(dòng)時(shí)更復(fù)雜。驚人地，我們已發(fā)現(xiàn)某種肽可以抑制T細(xì)胞遷移。盡管這種肽是已知的，但是我們證實(shí)的是，脂連蛋白通過(guò)誘導(dǎo)從B淋巴細(xì)胞釋放的介體而實(shí)現(xiàn)其對(duì)T細(xì)胞遷移的作用。這種介體(一種肽)看起來(lái)是T細(xì)胞跨內(nèi)皮遷移的抑制劑。專(zhuān)利技術(shù)概述所述肽具有序列N’-SVTEQGAELSNEER-C’或是其抑制T淋巴細(xì)胞遷移的類(lèi)似物。因此，在第一個(gè)方面，本專(zhuān)利技術(shù)提供一種用于治療和/或預(yù)防與T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎性疾病相關(guān)的病癥的方法，所述方法通過(guò)向有需要的患者施用包含N’-SVTEQGAELSNEER-C’的肽。所述肽還可以是其抑制T淋巴細(xì)胞遷移的類(lèi)似物或變體。所述病癥任選地選自由以下各項(xiàng)組成的組：T細(xì)胞自身反應(yīng)性，T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎性疾病和自身免疫疾病。備選地，所述病癥可以是T細(xì)胞自身反應(yīng)性或T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎性疾病或自身免疫疾病。應(yīng)當(dāng)理解，術(shù)語(yǔ)T細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞在本文中可以互換。T細(xì)胞的遷移任選地是夸內(nèi)皮的。內(nèi)皮任選地是分隔胰島細(xì)胞與血液供給的胰腺微血管系統(tǒng)的內(nèi)皮。所述肽任選地是分離的肽。所述肽可以是合成的(即化學(xué)合成的，例如以與小分子藥物相同的方式)或它可以重組地生產(chǎn)，例如在單獨(dú)的細(xì)胞系統(tǒng)(細(xì)胞培養(yǎng)物)或動(dòng)物中。我們已發(fā)現(xiàn)是有用的肽的氨基酸序列為SVTEQGAELSNEER(SEQIDNO:1)。這個(gè)序列可以包含在更大的肽或蛋白質(zhì)、或嵌合或融合蛋白內(nèi)。備選地，所述肽可以僅由SEQIDNO:1構(gòu)成。所有這些都落入如本文所用的肽的定義中。根據(jù)SEQIDNO:1的肽表示14.3.3ζ/δ(14.3.3.ζδ)蛋白的氨基酸28-41，其又是YWHAZ基因的245個(gè)氨基酸的產(chǎn)物。還優(yōu)選的是，可以使用所述肽的類(lèi)似物或變體。這方面特別優(yōu)選的是基于保守氨基酸置換的類(lèi)似物(或變體)。優(yōu)選的肽為14個(gè)氨基酸長(zhǎng)，盡管所述肽也可以少達(dá)13、12、11或10個(gè)氨基酸或多達(dá)15、16、1718、19或20個(gè)氨基酸。當(dāng)插入或去除氨基酸時(shí)，這些優(yōu)選插入到所述肽的N和/或C末端或從其N(xiāo)和/或C末端去除。保護(hù)所述肽免于體內(nèi)降解或清除的化學(xué)結(jié)構(gòu)的其他修飾也是優(yōu)選的變體，例如但不限于，利用本領(lǐng)域已知的接頭或間隔物的PEG化(PEGylation)。最優(yōu)選地，相比于SVTEQGAELSNEER，任何類(lèi)似物應(yīng)保留或改進(jìn)所期望的功能，即抑制T細(xì)胞遷移。這可以通過(guò)對(duì)互有關(guān)系的受體(cognatereceptor)的親和性的變化或改變所述肽在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征的變化。應(yīng)當(dāng)理解，現(xiàn)在在現(xiàn)有技術(shù)中是改變肽化學(xué)來(lái)增加肽在體內(nèi)的藥理‘特征’，并且這些變化不僅是基于氨基酸置換。本文將提及肽，但應(yīng)理解，除非另有說(shuō)明，這也涵蓋其任何類(lèi)似物。肽的作用可以作為其互有關(guān)系的受體的激動(dòng)劑。T細(xì)胞遷移的抑制可以是例如從血液中將所述細(xì)胞募集至胰腺。任選地，T細(xì)胞是自身反應(yīng)性T細(xì)胞。這些可以優(yōu)選地靶向胰腺，尤其是胰腺的胰島細(xì)胞。T細(xì)胞可以是CD4+或CD8+。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述肽用于抑制(即減少)自身反應(yīng)性T細(xì)胞募集至胰腺的胰島。應(yīng)當(dāng)理解，所述肽作用于其施用的個(gè)體。同樣，任何T細(xì)胞的自身反應(yīng)性是針對(duì)來(lái)自該個(gè)體的自身(即胰腺的胰島細(xì)胞)的反應(yīng)性。所述個(gè)體是哺乳動(dòng)物，任選地，嚙齒動(dòng)物如大鼠或小鼠，或靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物，特別是猿和人。當(dāng)肽的存在用于抑制T細(xì)胞的遷移時(shí)，增加個(gè)體被暴露的肽的量將用于進(jìn)一步抑制所述遷移。任選地，遷移的抑制水平使得遷移減少至少50％(依據(jù)被募集的T細(xì)胞的數(shù)量)，但最優(yōu)選地這種減少為至少60％，更優(yōu)選地至少70％，更優(yōu)選地至少80％，更優(yōu)選地至少90％，更優(yōu)選地至少95％，更優(yōu)選地至少99％并且最優(yōu)選地減少至可忽略水平。當(dāng)然，理想地，沒(méi)有T細(xì)胞將遷移，但這可能不現(xiàn)實(shí)，并且事實(shí)上，所需的一切在于，靶組織(例如胰島細(xì)胞)的正常功能被很大程度上保持和/或回轉(zhuǎn)(或至少盡可能接近正常水平或期望減輕要治療的病癥)。本專(zhuān)利技術(shù)的肽因此最可用于治療大量病癥。這些包括其中T細(xì)胞在與T細(xì)胞自身反應(yīng)性相關(guān)的病理學(xué)或病癥中起作用的那些疾病。這些可以包括T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎性疾病和自身免疫疾病。糖尿病(1型)是特別優(yōu)選的。還預(yù)期青少年型糖尿病(juvenileonsetdiabetes)，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis)和克羅恩氏病(Crohn’sdisease)，動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis)，銀屑病(psoriasis)，炎性和纖維化肝病(包括脂肪性肝炎(steatohepatitis)和肝硬化(cirrhosis))以及葡萄膜炎(uveitis)。因此所述肽優(yōu)選發(fā)揮作用以治療任何上述疾病，但最優(yōu)選地是1型糖尿病(T1D)。所述肽可以被視為用于挽救或保持剩余的胰腺功能。這可以是由于自身反應(yīng)性T細(xì)胞攻擊所致而發(fā)生的喪失功能。所述肽可以被視為用于改善糖尿病結(jié)果，即減少T1D的癥狀。所述肽還可以被視為用于改善與胰腺功能喪失相關(guān)的其他病狀，其包括與胰腺功能喪失相關(guān)、(又)與T1D相關(guān)的腎(例如腎病；糖尿病腎病)，神經(jīng)(例如外周神經(jīng)病)和心血管并發(fā)癥(例如由于加速的動(dòng)脈粥樣硬化所致的糖尿病視網(wǎng)膜病和心腦疾病)。因此，所述肽可以最有用于治療和/或預(yù)防上述病癥，特別是T1D及其共發(fā)病(如所述的)。本專(zhuān)利技術(shù)還提供編碼所述肽的多核苷酸序列，其也可用于治療和/或預(yù)防任何上述病癥。所述多核苷酸可以是DNA，RNA或DNA/RNA雜交物(DNA/RNAhybrid)。這種多核苷酸編碼所述肽或其類(lèi)似物。盡管存在相當(dāng)大量的可能組合，但是我們提供編碼SVTEQGAELSNEER(SEQIDNO:1)的氨基酸序列的多核苷酸的至少兩個(gè)實(shí)例。它們是：5’-AGUGUUACUGAACAAGGUGCUGAGUUAUCUAAUGAGGAGAGA-3’(SEQIDNO:2)；或5’-AGCGUCACCGAGCAGGGCGCCGAAUUGUCCAACGAAGAGAGG-3’(SEQIDNO:3)。以上序列僅是實(shí)例，并且以RNA形式給出，但是本專(zhuān)利技術(shù)還提供其DNA形式(其中T替代U)和DNA/RNA雜交形式，以及RNA，DNA和RNA/DNA雜交形式的互補(bǔ)序列(該互補(bǔ)序列為RNA，DNA或DNA/RNA)。優(yōu)選具有至少80％序列同源性的變體，該變體編碼例如與SEQIDNO:1至少50％同樣有效的肽。還優(yōu)選具有至少功能85％序列同本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
用于治療和/或預(yù)防與T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎性疾病相關(guān)的病癥的方法，所述方法通過(guò)向患者施用抑制T細(xì)胞遷移的包含N’?SVTEQGAELSNEER?C’(SEQ?ID?NO:1)的肽或其類(lèi)似物。

【技術(shù)特征摘要】
【國(guó)外來(lái)華專(zhuān)利技術(shù)】2012.01.13 GB 1200555.91.肽在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療和/或預(yù)防與T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎性疾病相關(guān)的病癥，其中所述肽由序列N’-SVTEQGAELSNEER-C’組成并且抑制T細(xì)胞遷移。2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中所述病癥選自由以下各項(xiàng)組成的組：T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性炎性疾病和自身免疫疾病。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中所述病癥是T細(xì)胞自身反應(yīng)性。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中所述病癥是1型糖尿病。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中所述病癥選自由以下各項(xiàng)組成的組：類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；克羅恩氏病；動(dòng)脈粥樣硬化；銀屑病；包括脂肪性肝炎和肝硬化在內(nèi)的炎性和纖維化肝病；和葡萄膜炎。6.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中所述T細(xì)胞的遷移是跨內(nèi)皮細(xì)胞的，越過(guò)分隔胰島細(xì)胞與血液供給的胰腺微血管系統(tǒng)的內(nèi)皮。7.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中所述T細(xì)胞是自身反應(yīng)性T細(xì)胞。8.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中所述肽用于抑制募集自身反應(yīng)性T細(xì)胞至胰腺的胰島。9.多核苷酸在制備藥物中的...

【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：喬治·愛(ài)德華·雷格爾，帕爾特·納倫德蘭，海倫·麥格特里克，馬里亞姆·希梅，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：伯明翰大學(xué)，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：英國(guó);GB